兔肝(VX2兔肝移植腫瘤模型的制作方法)，36創業加盟網給大家帶來詳細的介紹，讓更多的人可以參考:兔肝(VX2兔肝移植腫瘤模型的制作方法)。
VX2兔肝移植腫瘤模型的制作方法
本發明涉及一種vx2兔肝移植腫瘤模型，屬于生物醫學技術領域。
背景技術：
Hepatocellular carcinoma, hepatocellularcarcinoma, hcc 是最常見的惡性腫瘤之一。其全球發病率在男性中排名第五，在腫瘤死亡率中排名第二，在女性發病率中排名第七。排名第六。其中約85%發生在發展中國家，尤其是東南亞和非洲肝病毒和乙肝病毒流行的地區。中國肝癌發病率占全球肝癌發病率的46.6%。早期肝癌通常沒有明顯的癥狀。除了少數可以接受根治性治療的早期肝癌患者外，絕大多數肝癌患者被發現時已處于中晚期，失去了進行根治性手術的機會。經導管動脈化療栓塞，tace是巴塞羅那臨床肝癌晚期肝癌患者使用最廣泛的治療方法，bclc分期。與正常肝組織不同，肝癌約90%的血供通常來自肝動脈，只有不到10%來自門靜脈，這為tace治療提供了理論依據。在模擬人體tace手術中，兔vx2肝腫瘤模型具有不可替代的優勢，也是介入領域實驗研究的首選動物模型。
vx2 細胞系是由shope 病毒誘導的兔皮膚鱗狀細胞癌建立的腫瘤細胞系，經過數十次傳代。其特點主要有：腫瘤形成率高，腫瘤生長快，血供差，血供不足。大多數腫瘤和病理類型是鱗狀細胞癌。兔肝移植瘤的血供與人肝癌相似，均主要由肝動脈供血。是肝癌介入治療實驗常用的荷瘤動物模型。目前家兔vx2肝腫瘤模型中常用的腫瘤種植方法有：開腹下成瘤、經皮超聲和CT引導下腫瘤細胞懸液注射。目前實驗方法的問題是開腹：時間長，熟練的手術開腹縫合兔子需要1小時；開放性腫瘤損傷較大，術后極易發生腹壁種植轉移。極大地影響了后期的介入實驗，最終影響了實驗結束時的標本選擇。但超聲引導下穿刺細胞懸液注射法成瘤率低，單瘤成瘤效果差，易發生腹腔播散。
技術實現要素：
本發明要解決的技術問題是：現有技術中兔vx2肝腫瘤模型并發癥多，成瘤率低兔肝，單個成瘤效果差，易發生腹部播散，手術費時腫瘤接種方法等問題。
為解決上述技術問題，本發明提供了一種構建vx2兔肝移植腫瘤模型的方法，包括以下步驟：
第一步：制備肌肉注射麻醉劑，麻醉劑濃度為3%戊巴比妥鈉，用量為1ml/kg；
第2步：將vx2瘤塊肌肉注射成1×1×1mm3大小的瘤塊，麻醉后接種幼兔形成瘤。兔子大腿肌肉部分；
第3步：取第2步從腫瘤形成中獲得的vx2腫瘤組織，快速保存在4°C pbs中。細胞手術臺將腫瘤周圍的肌肉組織切除兔肝，得到腫瘤塊，將腫瘤塊切成1×1×1mm3大小，移植入健康成年兔肝臟進行種植。
本發明還提供了一種vx2兔肝移植腫瘤模型，采用上述vx2兔肝移植腫瘤模型的構建方法構建而成。
與現有技術相比，本發明的有益效果是：
本發明的vx2兔肝移植腫瘤模型成瘤率高。腫瘤形成通常表現為單個腫瘤，腹腔著床轉移和腹腔感染的概率較低，有利于后續實驗研究。
具體實現方法
為了使本發明更易于理解，下面對優選實施例進行詳細說明。
一個vx2兔肝移植腫瘤模型，其構建方法包括以下步驟：
第一步：Vx2腫瘤塊荷瘤兔腫瘤形成
首先選擇1000g左右的新西蘭大白兔作為荷瘤兔。幼兔的免疫系統尚不完善，容易形成肌肉瘤。兔麻醉劑制劑，戊巴比妥鈉粉劑濃度3%3g/100mlns，麻醉劑用量1ml/kg，肌肉注射后約10分鐘見效；優點：一是操作簡單，一個人即可快速完成。它不需要特殊的固定；其次，比靜脈注射更重要的是不會因為藥物進入血液過快而導致兔子死亡；最后，3%制劑，肌注液總量少，不會引起肌肉水腫。麻醉生效后，刮去大腿上的兔毛。如有可能，使用脫毛膏去除毛發，以減少毛皮對手術區域的影響；剃須完成后，對局部皮膚進行消毒。
然后對瘤塊進行處理，將瘤塊切成1×1×1mm3大小的瘤塊，用1ml注射器將其吸入管內，用18g針穿刺皮膚，將穿刺針放入兔體內大腿兩側肌肉，進入肌肉深度0.5cm，注射瘤塊后局部壓迫止血；等待2周腫瘤形成。
第 2 步：Vx2 腫瘤塊植入肝臟
在荷瘤兔中等待2周后，肌內腫瘤直徑約為1cm。局部脫毛消毒后，切開皮膚，分離周圍組織，游離腫瘤，快速保存于4℃pbs。細胞手術臺切除腫瘤周圍的肌肉。組織組織，將瘤塊切成1×1×1mm3大小備用；健康兔3.5kg成年新西蘭白兔，麻醉后，腹部脫毛消毒，穿刺點局部利多卡因局部麻醉；將腫瘤塊通過使用眼科鑷子插入超聲穿刺針的尖端。在超聲引導下，穿刺兔子肝臟的左葉。選擇肝門附近較厚的區域。穿刺針進入肝臟深度為 1 厘米。確定位置后，插入超聲穿刺針芯。將針頭內的腫瘤組織推入肝實質，拔出穿刺針，按壓止血。等待2周形成腫瘤，形成腫瘤后得到vx2兔肝移植腫瘤模型。
上述實施例僅為本發明的優選實施例而已，并不以任何形式或實質限制本發明。需要指出的是，對于本領域普通技術人員來說，在不脫離本發明的前提下，可以進行多種改進和補充，這些改進和補充也應視為本發明的保護范圍。
技術特點：
1.一種vx2兔肝移植腫瘤模型的構建方法，其特征在于包括以下步驟：
第一步：制備肌肉注射麻醉劑，麻醉劑濃度為3%戊巴比妥鈉，用量為1ml/kg；
第2步：將vx2瘤塊肌肉注射成1×1×1mm3大小的瘤塊，麻醉后接種幼兔形成瘤。兔子大腿肌肉部分；
第3步：取第2步從腫瘤形成中獲得的vx2腫瘤組織，快速保存在4°C pbs中。細胞手術臺將腫瘤周圍的肌肉組織切除，得到腫瘤塊，將腫瘤塊切成1×1×1mm3大小，移植入健康成年兔肝臟進行種植。
2.一種vx2兔肝移植腫瘤模型，其特征在于采用權利要求1所述的vx2兔肝移植腫瘤模型的構建方法構建而成。
技術總結
本發明公開了一種VX2兔肝移植腫瘤模型。本發明VX2兔肝移植腫瘤模型的構建方法包括：首先配制肌內注射麻醉劑兔肝，麻醉劑濃度為3％戊巴比妥鈉，用量為1mL/kg；將肌注VX2瘤塊處理成1×1×1mm3大小的瘤塊，麻醉下接種幼兔形成瘤。腫瘤形成部位為幼兔雙側大腿肌肉；分離的 VX2 腫瘤組織在 4°C 下快速儲存在 PBS 中。細胞手術臺去除腫瘤周圍的肌肉組織，將腫瘤塊切成1×1×1mm3大小，移植到健康成年兔的肝臟中進行種植。本發明的VX2兔肝移植腫瘤模型成瘤率高。腫瘤形成通常表現為單個腫瘤，腹腔著床轉移和腹腔感染的概率較低，有利于后續實驗研究。
技術研發人員：楊敏杰；杜楠；張文;羅建軍；馬景榮；張子涵；周鑫；顏志平
受保護技術用戶：復旦大學附屬中山醫院
技術研發日：2021.06.10
技術公告日期：2021.08.31
總結：以上內容就是兔肝(VX2兔肝移植腫瘤模型的制作方法)詳細介紹，如果您對創業項目感興趣，可以咨詢客服或者文章下面留言，我們會第一時間給您項目的反饋信息。
