在微生物研究與發(fā)酵工程等領(lǐng)域,搖瓶培養(yǎng)是一項(xiàng)常用且重要的技術(shù)。但很多人或許會(huì)問(wèn):什么是搖瓶培養(yǎng)呢?搖瓶培養(yǎng),簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是將微生物菌種接種到裝有液體培養(yǎng)基的搖瓶中,通過(guò)搖床使搖瓶不斷晃動(dòng),為微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。這種培養(yǎng)方式能讓微生物與培養(yǎng)基充分接觸,促進(jìn)氧氣的溶解與傳遞,從而保證微生物良好生長(zhǎng)。接下來(lái),我們就對(duì)搖瓶培養(yǎng)進(jìn)行詳細(xì)介紹,包括它的原理、操作流程、應(yīng)用場(chǎng)景以及優(yōu)勢(shì)等內(nèi)容。
1、搖瓶培養(yǎng)是在菌種的篩選培養(yǎng)階段(中試),培養(yǎng)條件要盡可能和發(fā)酵生產(chǎn)的培養(yǎng)條件相近,但工作量大、時(shí)間長(zhǎng)、操作復(fù)雜;而自動(dòng)發(fā)酵罐培養(yǎng)是搖瓶培養(yǎng)的業(yè)化生產(chǎn)。
2、以食用菌金頂側(cè)耳為試驗(yàn)研究對(duì)象;用綜合PDA(馬鈴薯20g,葡萄糖20g,硫酸鎂1.5g,磷酸二氫鉀3.0g,水1000mL,pH自然)為液體培養(yǎng)基;以(25±1)℃,180r/min為氣浴恒溫振蕩器的溫度和振蕩速率。設(shè)定了60、80、100、120、140mL5個(gè)不同的裝液量。
3、經(jīng)過(guò)7d的搖瓶培養(yǎng),過(guò)濾發(fā)酵液,得到菌絲體和粗酶液。再通過(guò)測(cè)定菌絲體烘干后的生物量,以及測(cè)定粗酶液中多酚氧化酶和漆酶活性,得出了:裝液量為100mL,菌絲體烘干生物量明顯大于其他裝液量;裝液量為140mL,有利于多酚氧化酶的分泌,酶的活力較強(qiáng),并且其活力隨裝液量的遞增而變強(qiáng)。
4、裝液量為100mL,有利于漆酶的分泌,酶的活力較強(qiáng),不同裝液量的菌絲生長(zhǎng)都在第6天出現(xiàn)了高峰期,其中以裝液量為100mL/250mL時(shí),其菌絲球數(shù)量較多。
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